4種實時熒光PCR試劑在大米轉基因檢測中的應用比較

作者：權永兵,閆邦奇,王進,林偉,徐淼鋒,水克娟,廖力,張衛東

摘要：本文比較評價了4種熒光PCR試劑在大米轉基因檢測中的應用效果,篩選出最適合轉基因成分檢測的試劑,并建立相關檢測方法體系。將同一大米樣品提取的核酸做5個濃度梯度,用4種不同品牌的熒光探針PCR試劑同時擴增大米內源Gos9基因,分析4種試劑檢測結果的差異和相關性。4種試劑對目標基因均有特異性擴增,模板量最高(250 ng)時,編號為Ti的試劑擴增的Ct值最小(23.36),Bi是25.19,Pr和Ta差異不明顯(分別為27.76和27.35);當模板量為25 pg時,編號為Bi的試劑擴增的Ct值最小(35.45),其余分別為Ta(37.85)、Ti(35.85)和Pr(42.26)。由結果可以看出,Bi試劑的擴增效率、靈敏度和穩定性都優于其他試劑,特別是在模板量濃度低的情況下檢測結果最佳。不同試劑對相同模板的擴增效率不同,綜合評價得出Bi試劑的穩定性、靈敏度和準確度在4種試劑中最好,可穩定用于大米及其加工產品的轉基因檢測。

發文機構：拱北海關技術中心 珠海寶銳生物科技有限公司

關鍵詞：實時熒光PCR轉基因檢測real-time fluorescence PCRgenetically modifieddetection

分類號： TS210.7[輕工技術與工程—糧食、油脂及植物蛋白工程]