三種豬腹瀉相關病原微芯片檢測方法研究及初步應用

作者：高志強,汪琳,蒲靜,趙相鵬,尹羿,任彤,張偉,劉鳳華

摘要：為同時快速篩查豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)以及豬圓環病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)3種可致豬腹瀉的豬病病原,本研究基于微芯片技術,針對3種病毒特異性基因分別建立微量實時熒光(RT-)PCR檢測體系,并將其組合在微芯片上。結果顯示,該方法可特異性檢出以上3種病毒核酸,但不能檢出本實驗室保存的其他5種豬病病毒核酸,而且相互之間無交叉反應;靈敏度試驗顯示TGEV和PEDV檢測靈敏度均可達到1TCID_(50)/0.1 mL,對于含PCV2全基因組質粒,檢測極限為41 fg/μL。對237份送檢樣品的檢測結果顯示,PEDV和PCV2檢出率分別為0.8%和7.2%,但未檢出TGEV,與常規管式熒光(RT-)PCR檢測結果一致。該項技術可大大降低篩查的試劑成本,因為每個反應池只需要1.2μL的(RT-)PCR試劑混合物,而且比傳統的實時(RT-)PCR系統的熱平衡和熱均勻性更快。本研究表明該技術可用于豬相關疫病的快速檢測和篩查。

發文機構：北京海關技術中心 北京農學院

關鍵詞：豬腹瀉相關病毒微芯片熒光(RT-)PCRswine-diarrhea-related pathogensmicrochipreal-time(RT-)PCR

分類號： S85[農業科學—獸醫學]