作者:李戈輝,吳瑋,邸銘洋,王長城,楊桂朋,丁海兵
摘要:聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)是分離、純化蛋白質的常用技術。傳統的基于Laemmli方法(Laemmli膠)制備的十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺電泳膠(SDS-PAGE)能夠基于蛋白質分子量的不同分離蛋白質,蛋白質分離性能良好,但存在電泳時間長、保質期短等缺點,其應用有一定的局限性。本研究用三異丙醇胺、三乙醇胺等成分代替Laemmli膠中的三羥甲基氨基甲烷的鹽酸鹽(Tris-HCl)作為緩沖物質,獲得I型和II型兩種新型電泳膠。電泳實驗的結果表明這兩種新型電泳膠保持了Laemmli電泳膠優良的蛋白質分離性能,并能夠耐受更高的電壓,具有更快的電泳速度。加速壽命實驗的結果表明這兩種新型電泳膠具有比Laemmli膠和現在流行的商業預制膠更長的保質期。新型I電泳膠比新型II電泳膠分離性能更好,保質期更長,在37℃可儲存15天,相當于在4℃的保質期15個月。
發文機構:中國海洋大學海洋化學理論與工程技術教育部重點實驗室 中國海洋大學化學化工學院 迪申生物技術(上海有限公司)
關鍵詞:聚丙烯酰胺凝膠電泳蛋白質分離三異丙醇胺三乙醇胺電泳膠保質期polyacrylamide gel electrophoresisprotein separationtriisopropanol aminetriethanolamineshelf life of electrophoresis gel
分類號: Q-331[生物學—生物化學]Q503