激光顯微切割條斑紫菜葉狀體的參數優化

作者：曹逸飛,李小姣,曲偉華,茅云翔,杜國英

摘要：本研究以經濟紅藻條斑紫菜(Pyropia yezoensis)為研究對象,應用激光顯微切割技術(Laser Microdissection,LMD)分離不同時期、不同部位、不同組織紫菜葉狀體細胞團。統計細胞團中成活細胞比例,測定成活率,并應用葉綠素熒光成像法測定成活細胞光合活性,建立適合不同類型細胞的激光顯微切割流程。結果表明:(1)整個切割流程需要在30 min內完成,不同材料成活率由高到低為:精子囊、成熟紫菜頂部、紫菜幼苗基部、成熟紫菜基部、幼苗頂基部,同株紫菜相同區域的中央與邊緣細胞切割后成活率相近;(2)顯微切割獲得的紫菜細胞團的各項葉綠素熒光參數中,最大光量子傳遞效率Fv/Fm、實際光量子傳遞效率Y(Ⅱ)、光化學淬滅qP下降、非光化學淬滅qN上升,其中Fv/Fm、Y(Ⅱ)變動均高于其他參數,可作為指示切割細胞團光合能力的敏感指標;(3)不同時期紫菜適用的切割技術不同:成熟條斑紫菜在10、20、63倍鏡下切割的直徑100~300μm細胞團,幼苗在6.3、10、20倍鏡下切割的直徑150~300μm細胞團,成活率高且具有較高的光合活性。本研究針對條斑紫菜不同材料摸索形成適宜的切割技術參數,最少可從100μm直徑細胞團(約20細胞)中獲取1~6個成活細胞,為細胞的精確分離提供了新的技術手段。

發文機構：中國海洋大學海洋生命學院 海南熱帶海洋學院水產與生命學院

關鍵詞：條斑紫菜激光顯微切割細胞分離葉綠素熒光成像技術光合活性Pyropia yezoensisLMDcell dissectionchlorophyll fluorescencephotosynthetic activity

分類號： Q949.29[生物學—植物學]