尼羅羅非魚Galectin-4基因的原核表達及誘導條件優化

作者：張志強,劉鑫潮,牛金中,黃瑜,王蓓,簡紀常

摘要：【目的】研究尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)Galectin-4基因(記作OnGal-4)的原核表達,為大量獲取尼羅羅非魚Galectin-4蛋白(OnGal-4)和后續功能研究奠定基礎。【方法】根據NCBI上公布的尼羅羅非魚Galectin-4基因序列(Genbank:XM-019345120)設計引物,構建原核表達載體,誘導Galectin-4重組蛋白(r OnGal-4)在BL21原核表達系統中表達,并優化其誘導條件。【結果與結論】成功擴增出OnGal-4基因,并構建原核表達載體pGEX-4T-On Gal-4。rOnGal-4最佳誘導條件是溫度28℃,IPTG濃度0.4 mmol/L,誘導時間4 h。在此條件下,rOnGal-4在可溶性蛋白中大量表達。Western-blot結果顯示,rOnGal-4可與抗GST標簽的單克隆抗體發生特異性反應。

發文機構：廣東海洋大學水產學院//廣東省水產經濟動物病原生物學及流行病學重點實驗室//廣東省水產經濟動物病害控制重點實驗室

關鍵詞：尼羅羅非魚Galectin-4基因克隆原核表達條件優化Oreochromis niloticusGalectin-4gene cloneprokaryotic expressioncondition optimization

分類號： Q78[生物學—分子生物學]Q959.223.63[生物學—動物學]