基于PCR和TOF-MS海洋源產脂肽芽孢桿菌篩選

作者：鄧旗,花梅芳,楊秀文,孫力軍,蒲月華,王雅玲,廖建萌,劉穎,房志家

摘要：【目的】準確高效分離紅樹林等海洋環境中產脂肽芽孢桿菌。【方法】將前期從紅樹林環境篩出具有抗菌活性的12株芽孢菌株作為研究菌株,采用溶血活性及排油作用對其中的可能產脂肽菌株進行初步篩選,并基于脂肽合成酶基因PCR擴增法對脂肽合成酶基因攜帶菌復篩,采用飛行時間質譜(TOF-MS)對所產脂肽進行鑒定。【結果】初步發現6株芽孢桿菌具有溶血活性,其中HY-5、HY-4和HN-9這3株具有排油能力,油層透明圈的直徑分別為45、32和3 mm。PCR擴增檢測到HY-5含有iturin、surfactin和bacillomycin D合成酶基因,HY-4含有iturin、surfactin合成酶基因,HN-9含有iturin合成酶基因。TOF-MS檢測到HY-5和HY-4的發酵液含surfactin、iturin和bacillomycin 3種脂肽,HN-9的發酵液只含iturin。【結論】基于PCR與TOF-MS為核心的級聯技術,建立一種海洋源脂肽產生菌快速篩選以及脂肽譜快速鑒定的方法,解決海洋源芽孢桿菌在常規培養基難合成脂肽造成的漏篩情況。

發文機構：廣東海洋大學食品科技學院//廣東省水產品加工與安全重點實驗室//廣東省海洋生物制品工程實驗室//廣東省海洋食品工程技術研究中心//水產品深加工廣東普通高等學校重點實驗室 海洋食品精深加工關鍵技術省部共建協同創新中心//大連工業大學 廣東省特種設備檢測研究院湛江檢測院 湛江市食品藥品檢驗所

關鍵詞：海洋脂肽PCR擴增芽孢桿菌質譜marinelipopeptidePCR amplificationbacillusmass spectrum

分類號： S9[農業科學—水產科學]TS201[輕工技術與工程—食品科學]