作者:楊易,高靜,陳彥,魯冰,謝莉萍,張榮慶
摘要:【目的】研究無定型碳酸鈣結合蛋白(ACCBP)基因的上游調控機制。【方法】以合浦珠母貝(Pinctada fucata)為研究對象,利用基因組步移技術克隆合浦珠母貝ACCBP基因(PfACCBP)的啟動子。設計啟動子截短實驗,通過雙熒光素酶標記法確定啟動子與轉錄因子CREB的結合位點,定位啟動子中的功能元件。克隆轉錄因子環腺苷效應元件結合蛋白(CREB),并通過共轉染實驗和凝膠遷移率分析檢測啟動子的相對轉錄活性。【結果】獲得合浦珠母貝ACCBP基因的啟動子序列,ACCBP啟動子在HEK-293T細胞系中轉錄活性較高;該啟動子上存在CRE元件,該元件可在轉錄過程中與CREB蛋白直接結合,大幅上調ACCBP啟動子的轉錄效率。【結論】轉錄因子CREB可通過與ACCBP啟動子上的CRE元件結合而增強轉錄活性的調控作用。
發文機構:清華大學生命科學學院
關鍵詞:合浦珠母貝無定型碳酸鈣結合蛋白環腺苷效應元件結合蛋白啟動子轉錄活性Pinctada fucataAmorphous Calcium Carbonate Binding ProteincAMP-response element binding proteinpromotertranscription ability
分類號: Q493.2[生物學—生理學]