凡納濱對蝦miRNA-184克隆與表達分析

作者：梁金榮,許鑾佳,李玲,郭慧,申玉春

摘要：【目的】研究凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)miRNA-184 [microRNA-184(miR-184),記作LvmiR-184]在健康蝦及染病蝦中的表達,探討其免疫功能。【方法】用莖環法克隆鑒定凡納濱對蝦LvmiR-184,通過熒光定量PCR檢測LvmiR-184在對蝦血淋巴、肝胰腺、鰓、肌肉、心臟、胃、腸和眼柄等8個組織中的分布。對凡納濱對蝦注射副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),檢測LvmiR-184不同時間點的響應變化。對感染副溶血弧菌的凡納濱對蝦分別注射0.3、3.0和30.0 ng的mi R-184模擬物和抑制物,檢測不同時間點對蝦血細胞凋亡率。【結果與結論】LvmiR-184在所有組織中均有表達,在胃中表達量最高,其次是肌肉,鰓表達量最低。注射副溶血弧菌后1.5 h,LvmiR-184表達量顯著上調;在24 h達到峰值,較對照組高8.25倍;對照組則維持在較低的水平。模擬物、抑制物注射量為30 ng時對蝦血細胞凋亡率差異有統計學意義(P <0.05);與對照組凋亡率相比,注射模擬物6 h后提高62%。LvmiR-184可調控凡納濱對蝦的血細胞凋亡。

發文機構：廣東海洋大學水產學院/湛江市海洋生態與養殖環境重點實驗室

關鍵詞：凡納濱對蝦MICRORNA基因克隆基因表達細胞凋亡Litopenaeus vannameimicroRNAgene cloninggene expressionhemocyte apoptosis

分類號： Q78[生物學—分子生物學]Q959.223.63[生物學—動物學]