波吉卵囊藻蛋白質提取方法比較及提取條件優化

作者：洪廷,任佳佳,張寧,李長玲,黃翔鵠

摘要：【目的】探究基于考馬斯亮藍染色法的波吉卵囊藻(Oocystis borgei)蛋白質提取方法,以快速測定波吉卵囊藻的蛋白質含量。【方法】以凱氏定氮法為基準,以考馬斯亮藍法測定經反復凍融法、超聲波破碎法和堿提法提取的波吉卵囊藻(鮮品)蛋白含量,比較各提取方法的提取效果;通過單因素和響應面實驗,考察堿提法中提取溫度、NaOH濃度和提取時間對波吉卵囊藻蛋白提取率的影響。【結果】堿提法顯著優于其他提取方法(P<0.01);堿提法中,各因素對波吉卵囊藻蛋白提取率的影響顯著性由大到小依次為提取溫度、NaOH濃度、提取時間;最佳提取條件:提取溫度74.5℃、NaOH濃度0.35mol/L、提取時間69min,此時蛋白得率為1.726%,與模型預測值1.731%接近,以凱氏定氮法測定的藻體蛋白質含量為基準,蛋白提取率高達99.20%。【結論】堿提法是波吉卵囊藻(鮮品)蛋白的最佳提取方法,采用響應面法建立的模型可較好地預測提取溫度、NaOH濃度和提取時間對波吉卵囊藻蛋白提取率的影響。

發文機構：廣東海洋大學水產學院 廣東海洋大學深圳研究院 廣東省藻類養殖及應用工程技術研究中心

關鍵詞：波吉卵囊藻蛋白提取快速提取考馬斯亮藍法響應面法Oocystis borgeiprotein extractionrapid extractionCoomassie blue staining methodresponse surface methodology

分類號： Q946.1[生物學—植物學]Q949.217