金槍魚精巢魚精蛋白制備及活性評價

作者：王斌,楊繡榮,鄔華威,何宇

摘要：【目的】建立并優化金槍魚精巢中魚精蛋白的制備方法,并研究其肝素拮抗效應。【方法】通過單因素和響應面試驗,優化金槍魚魚精蛋白的提取工藝,采用羧甲基-瓊脂糖凝膠CL-6B(CM Sephaorse CL-6B)離子交換層析對金槍魚魚精蛋白粗品進行純化,并通過坂口反應、Tricine-十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)電泳、氨基酸分析和肝素結合力-滴定法測定樣品純度和效價。【結果與結論】確定金槍魚魚精蛋白的提取最佳工藝條件為提取溫度36℃、硫酸濃度0.4 mol/L、液料比為6∶1、提取時間65 min,在此條件下得率為12.51%±1.2%。采用CM Sephaorse CL-6B離子交換層析對金槍魚魚精蛋白粗品進行純化,獲得Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3個組分。坂口反應顯示組分Ⅲ呈現陽性反應,Tricine-SDS-PAGE電泳表明其分子質量為6.5~21.1ku,氨基酸質量分數為76.90%±0.37%,堿性氨基酸質量分數為39.00%±0.27%,精氨酸質量分數為25.86%±0.32%,肝素結合力-滴定法測定結果顯示組分Ⅲ的效價約為標品魚精蛋白的2/3。以上結果證明組分Ⅲ為目標蛋白,即金槍魚魚精蛋白。

發文機構：浙江海洋大學食品與醫藥學院 寧波今日食品有限公司

關鍵詞：金槍魚精巢魚精蛋白活性Skipjack tuna(Katsuwonus pelamis)miltprotamineactivity

分類號： R151.3[醫藥衛生—營養與食品衛生學]